באָווין טובערקולאָסיס אַנטיבאָדי עליסאַ קיט

באַשרייַבונג

בטב אב עליסא

בדעה ניצן: די באָווין טובערקולאָסיס אַנטיבאָדי ELISA דעטעקשאַן קיט איז פֿאַר די באַשטימונג פון באָווין טובערקולאָסיס

אַנטיבאָדי אין באָווין סערום פון Mycobacterium bovis אין וויטראָ.

די פּראָבע איז געניצט צו אַססעסס די ינפעקציע פון ​​באָווין טובערקולאָסיס. MPB70-MPB83 טשימעראַ רעקאָמבינאַנט איז געווען געווענדט אין דעם פּראָבע.

מוסטער: סערום

מאַטעריאַלס פארלאנגט אָבער ניט צוגעשטעלט:

פּיוראַפייד וואַסער

פּיפּעטטאָר

96-געזונט מיקראָפּלאַטע לייענער (450nm)

טיימער

סענטריפיוזש (4000 רפּם)

וואַשמאַשין

ויוון (37 גראַד)

טעסט פּראָוסידזשערז & ינטערפּריטיישאַן

שריט 1טעסט פּראָצעדור

1.1 וואַש סאַלושאַן צוגרייטונג

Wאָרקינג קאַנסאַנטריישאַן wאַשינג פליסיק:איידער נוצן, די וואַש לייזונג זאָל זיין געזונט צו צימער טעמפּעראַטור (20-25 גראַד) און שאַקינג יוואַנלי צו מאַכן עס מונדיר. דערנאָך צעפירן די קאַנסאַנטרייטאַד וואַש לייזונג 20 מאל מיט פּיוראַפייד וואַסער (למשל, 5 מל קאַנסאַנטרייטאַד וואַשינג לייזונג איז מוסיף צו 95 מל פּיוראַפייד וואַסער), מישן געזונט און די דיילוטאַד וואַשינג פליסיק קענען זיין סטאָרד אין 2-8 גראַד פֿאַר 7 טעג.

1.2 מוסטער צוגרייטונג

① גאַנץ כייַע בלוט איז גענומען, סענטריפודזשד ביי 4000 רפּם פֿאַר 10 מינוט, און סופּערנאַטאַנט איז געזאמלט. סערום קענען אויך זיין קאָאַגיאַלייטיד געוויינטלעך אָן העמאָליסיס.

② צעפירן די סערום מוסטער 1:100 (לייג 2ul סערום מוסטער צו 198ul מוסטער דיילוענט) און מישן ונ דורך.

באַמערקונג: נעגאַטיוו און positive קאָנטראָלס דאַרפֿן ניט זיין דיילוטאַד.

1.3 ענזיים קאָנדזשוגאַטע צוגרייטונג

צעפירן די ענזיים קאָנדזשוגאַטע 1:200 (לייג 5ul ענזיים קאָנדזשוגאַטע (קס100) צו 995ul מוסטער דיילוענט) און מישן ונ דורך.

1.4 טעסט פּראָצעדור

① נעמען די ענזיים פירמע מיקראָפּלאַטע (לויט די נומער פון סאַמפּאַלז, קענען זיין דיסאַסעמבאַלד און געוויינט עטלעכע מאָל), לייגן 100ul פון די דיילוטאַד סערום צו די ענזיים פירמע מיקראָפּלאַטע, שטעלן צוויי וועלז יעדער פֿאַר נעגאַטיוו און positive סאַמפּאַלז, און לייגן 100ul יעדער פֿאַר נעגאַטיוו און positive קאָנטראָלס צו דער אָפּרוף געזונט ריספּעקטיוולי. דזשענטלי שאָקלען די מוסטער אין די געזונט, ניצן די סילינג טעלער פילם צו דעקן דעם טעלער, און ינגקיובייט בייַ 37 גראַד פֿאַר 30 מינוט.

②עפֿן די סילינג טעלער פילם, שאָקלען אַוועק די לייזונג אין די טעלער געזונט, לייגן 300 μל פון ארבעטן קאַנסאַנטריישאַן וואַשינג פליסיק צו יעדער געזונט, און דעמאָלט אַוועקוואַרפן די פליסיק אין די געזונט. איבערחזרן די אויבן סטעפּס 5 מאל, און לעסאָף טרוקן אויף אַ ריין אַבזאָרבאַנט פּאַפּיר.

③ לייג 100 μל ענזיים קאָנדזשוגאַטע צו יעדער געזונט, דעקן די טעלער און ינגקיובייט ביי 37 גראַד פֿאַר 45 מינוט.

④ עפֿן די סילינג טעלער פילם, שאָקלען אַוועק די לייזונג אין די טעלער געזונט, לייגן 300 μל פון ארבעטן קאַנסאַנטריישאַן וואַשינג פליסיק צו יעדער געזונט, און דעמאָלט אַוועקוואַרפן די פליסיק אין די געזונט. איבערחזרן די אויבן סטעפּס 5 מאל, און לעסאָף טרוקן אויף אַ ריין אַבזאָרבאַנט פּאַפּיר.

⑤ לייג 100 μל סאַבסטרייט לייזונג צו יעדער געזונט, דעקן די טעלער און ינגקיובייט פֿאַר 10 מינוט בייַ 37 גראַד אַוועק פון ליכט.

⑥ לייג 50 μל האַלטן לייזונג צו יעדער געזונט און באַשטימען די רעזולטאַט ין 5 מינוט.

שריט 2 רעזולטאַט ינטערפּריטיישאַן

די OD450 ווערט פון יעדער געזונט איז געווען לייענען אויף די 96-געזונט מיקראָפּלאַטע לייענער.

2.1 וואַלאַדיישאַן

די דורכשניטלעך OD450nm ווערט פון נעגאַטיוו קאָנטראָל איז געווען<0.5 and the average OD450nm value of positive control was ≥1, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 קאַלקולאַטיאָן מעטאַד

פֿאַר יעדער מוסטער, רעכענען די S / P ווי גייט מיט די קערעקטאַד מוסטער און קאָנטראָל וואַלועס:

2.3 רעזולטאַט ינטערפּריטיישאַן

ווען S/P<0.25, it is judged as negative.

ווען S/P גרעסער ווי אָדער גלייַך צו 0.30, עס איז געמשפט ווי positive.

ווען 0.25 ווייניקער ווי אָדער גלייַך צו S/P<0.30, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

הייס טאַגס: באָווין טובערקולאָסיס אַנטיבאָדי עליסאַ קיט, טשיינאַ באָווין טובערקולאָסיס אַנטיבאָדי עליסאַ קיט סאַפּלייערז, מאַניאַפאַקטשערערז, פאַבריק